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今天讲讲分子生物学研究中最常用的手段：核酸凝胶电泳。这个“最常用”绝对当之无愧，我们实验室的十几台电泳仪没有一分钟是闲着的，我总怕有一天会上演几人因电泳仪而大大出手的画面~~核酸凝胶电泳是用于分离核酸（DNA或RNA）的一种传统手段。由于核酸在中性pH值下带负电荷，在外加电场的作用下会向负极迁移。在多孔介质中，不同分子量的核酸分子因迁移速率的不同而分离开来。当不同分子量的核酸结构相似时，其碱基数与迁移距离成反比。核酸电泳常用的多孔介质有两种：琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶，二者最大的不同是对于分离核酸分辨率的差异。琼脂糖凝胶更适合区分分子量较大的核酸分子，分辨率为200~50,000 bp。琼脂糖凝胶电泳通常使用水平方向的电泳设备。凝固后的琼脂糖置于电泳缓冲液中，当样品添加到凝胶孔中时，其中的核酸向正极水平移动，分子量较小的核酸会跑在前端，将分子量较大的核酸落在后面。聚丙烯酰胺凝胶更适合区分分子量较小的核酸分子，寡核苷酸一般也采用此方法进行分离，其分辨率通常为1~1000 bp。聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE）通常使用的是垂直向的电泳设备，样品由凝胶上端的孔中加入，其中的核酸则向下迁移，当然此时设备底端是接着正电极的。核酸本身是没有颜色的，因此在电泳过程中无法看到。为了能观测电泳的进程，通常在电泳时样品会与一种蓝色的loading buffer混合。这样，在电泳中，蓝色的loading buffer也会向正极迁移，从而指示电泳的进程。在电泳结束后，取下的凝胶通常会使用荧光染料对凝胶中的核酸染色，荧光染料一旦与核酸结合则会发出荧光，当使用凝胶成像仪对凝胶进行拍照时，则可清晰看到核酸的条带。还有一种更加简便的预染料也被经常使用，它只需要在配置凝胶时加入凝胶中，这样电泳中的核酸就可直接被染料结合，而无需电泳之后再进行染色。Ladder就是将一系列已知长度的DNA混合在一起，在电泳时，他们就会按照大小一一排好，这样未知长度的核酸与ladder中已知长度的条带对比一下，就可以获知核酸的大致长度啦。本次的仪器介绍就到这里啦，你还有什么想学的知识点欢迎发消息告诉我，下期见！
